Einrichtung eines CASA-Systems zur Entwicklung und Optimierung von Medien zur Spermabearbeitung

Abstract

Bei der Entwicklung von Kulturmedien, die mit Spermien in Kontakt kommen, wird deren Einfluss auf das biologische Material nach einer definierten Kontaktzeit mittels Parameter wie z.B. Spermienmotilität getestet. In dieser Bachelorarbeit wird zunächst eine neue Zählmethode für Spermien eingerichtet, da es Fehleranfälligkeiten bei der manuellen Zählung gibt und diese verringert werden sollen. Diese Methode nennt sich CASA-Methode (Computer Assisted Sperm Analysis). Im Anschluss wird überprüft, ob mit CASA der Einfluss mittels Literaturrecherche ausgewählter Faktoren (pH-Wert, Antioxidantien und Viskosität) auf die Qualität von Spermaproben ermittelt werden kann. Dafür werden praxisnahe Methoden (HOS- und Eosin-Test) und manuelle Grundparameter (Motilität, Volumen und Zellzahl) genutzt, die den Einfluss abbilden können. Hierbei muss jedoch berücksichtigt werden, dass die ausgewählte CASA-Software (ImageJ (Version: 1.54p) und TrackMate von Fiji) ein OpenSource-Programm ist, weshalb aufgrund fehlender Versionssicherheit nur zeitgleich prozessierte Kontroll-Test-Kombinationen verwendet werden. Durch eine quantitative Studie mit 16 Proben, von denen 5 zur Methodenethablierung und 8 zum Test zweier Probemedien genutzt wurden, wurde festgestellt, dass sich durch die CASA-Methode Proben analysieren lassen. 3 Proben wurden aufgrund abgeänderter Methodik nicht in die Auswertung einbezogen. So lagen normalisiert 77,94 % der Messwerte im Toleranzbereich (± 15 %) und 88,89 % der 13 getesteten Proben zeigten bei manueller Zählung und CASA eine ähnliche Motilitätsveränderung durch die ausgewählten Probemedien. CASA ist im Vergleich zur manuellen Zählung mit mehr Zeitaufwand verbunden.