Etablierung von Frozen Instant Assays mit kryokonservierten Zellen in 384-Well-Platten für Hochdurchsatzscreenings

Abstract

Ziel dieser Arbeit war es, das Einfrieren verschiedener Zellkulturen bei -80°C in 384 Well Platten zu etablieren. Für jede Zelllinie sollte eine optimale Aussaatdichte und Zusammensetzung des Kryomediums ermittelt werden. Nach dem Auftauen der Platten wurde die Vitalität der Zellen mittels des Resazurin Assays ermittelt. Darüber hinaus wurde die Stimulierbarkeit der Zellen anhand eines funktionalen Assays für die jeweilige Zelllinie überprüft. Die verwendeten Assays waren für die Zellen A549-NFκB-SEAP der SEAP Reportergen Assay, sowie für die Zellen CHO-CHRM1 der HTRF IP-One Assay