Durchflusszytometrische Untersuchungen zur Interaktion einer GFP-Fusionsvariante des Lipopolysaccharid-bindenden Proteins(LBP-GFP) mit der humanen Zelllinie HEK293-TLR4/MD-2

Abstract

In dieser Arbeit sollte ein Trypanblau-Quenching-Assay zur Untersuchung der Interak-tion einer GFP-Fusionvariante des LBP mit der humanen Zelllinie HEK293-TLR4/MD-2 eingesetzt werden. Durchflusszytometrische Untersuchungen sollten die Bindung des Fusionsproteins an die Zytoplasmamembran bestätigen. Des Weiteren sollte durch Fluoreszenzauslöschung eine Aussage über die Lokalisation der GFP-tragenden Domäne des LBP-GFP-Proteins getroffen werden. Die Interaktionen von Proteinen mit der Membran, sowie membranabhängige Aufnahmeprozesse wie die Phagozytose, sind in der Regel temperaturabhängig. Diese Abhängigkeit sollte in dieser Arbeit ebenfalls für das LBP-GFP-Fusionsprotein überprüft werden.