Validierung des mikrobiologischen Nachweises von Alicyclobacillus spp.IFU-Methode Nr. 12 versus Real time PCR

Abstract

Im Rahmen dieser Diplomarbeit sollte die Frage geklärt werden, ob beim Nachweis von Alicyclobacillus spp. mittels real-time PCR Verfahren, Ergebnisse schneller zur Verfügung stehen, als durch die kulturelle Methode gemäß IFUNr. 12. Erwartet wurde ein sicheres PCR-Ergebnis nach zwei – drei Tagen. Hierzu wurden 60 mit Alicyclobacillus spp. „natürlich“ kontaminierte Saftkonzentrat-Proben sowohl mit der kulturellen Methode der IFU-Nr. 12, als auch mit dem Verfahren der real-time PCR untersucht. Anschließend erfolgte ein Vergleich der beiden Verfahren gemäß DIN EN ISO 16140:2003. Des Weiteren galt es, die Nachweisgrenze der real-time PCR zu ermitteln. Dies erfolgte zudem anhand einer quantifizierten Verdünnungsreihe mit dem Stamm A. acidoterrestris ATCC 49025.